基因敲入细胞

基因敲入是指将外源性基因通过同源末端重组的方式插入到基因组中，使其在细胞内稳定表达的一种基因编辑技术。相比于基因敲除（KO），在设计 KI 的实验方案时需考虑的影响因素更多，如敲入基因片段的长短、同源重组效率等。

微谨生物提供一流基因敲入细胞定制服务，荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、安全位点基因敲入等均可实现。我们提供全方位的服务，包括多种类型的细胞基因KI和全流程的服务支持。联系我们13241131665（微信同号）

基因敲入细胞定制服务

微谨生物提供的基因敲入细胞定制服务，包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、安全位点基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体（含 Cas9）与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中，在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后，细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复（HDR）实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。

服务类型

• 哺乳动物细胞基因敲入：用于基础研究、研究肿瘤发生发展机制、药物筛选及评价等。
• ESC或iPSC干细胞基因敲入：用于再生医学、疾病建模等研究。
• 荧光/蛋白标签定点敲入
• 安全位点基因敲入

提高KI效率，微谨一直在路上

微谨生物提供基因敲入细胞株的构建服务，将人源化的 Cas 蛋白、双靶点 gRNA 和 Oligo DNA（donor DNA）同时转染至目的细胞，产生高效同源重组，实现基因的敲入。为了提高基因敲入效率，微谨生物采用自主开发的 CRISPR 细胞基因编辑系统，显著提高基因敲入细胞株构建过程中的高同源重组效率，并降低随机插入风险。此外，微谨生物还拥有丰富的项目经验，可根据客户的项目要求采用不同的方法体系，确保高成功率。

• 使用高活性gRNA：设计并筛选出高活性的gRNA是提高基因敲入效率的关键步骤。通过评估不同gRNA的切割活性，选择最合适的gRNA进行实验。
• 优化同源重组条件：同源重组修复是基因敲入的关键步骤之一。通过优化同源重组条件，如细胞状态、转染条件、DNA模板等，可以提高基因敲入效率。
• 使用Cas9蛋白和gRNA的稳定表达细胞系：通过建立Cas9蛋白和gRNA的稳定表达细胞系，可以长期高效地进行基因敲入实验。

技术优势

基因敲入细胞定制流程

1. 根据客户需求和靶基因的情况进行基因点突变方案设计
2. 构建gRNA载体和Donor载体
3. 通过核转染法将gRNA载体和Donor载体共转入目标细胞
4. 筛选出成功实现目的片段定点敲入的阳性克隆
5. 对阳性克隆进行扩增和测序验证

微谨生物致力于为客户提供品质最优的产品，客户的信赖是我们的最大动力！我们承诺所提供的服务均有品质保证，欢迎咨询！13241131665（微信同号）