| 培养基 | 90%RPMI-1640+10%FBS |
|---|---|
| 传代方法 | 复苏步骤：①冻存管从液氮或-80℃中取出放入PE手套中，迅速没入37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1分钟内全部溶解为宜；②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9ml 完全培养基的离心管内，1000-1200rpm/min离心5分钟，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。③然后将细胞悬液加入到含有6-8mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱中竖立培养。细胞传代：①离心法：收集细胞，1000rpm条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含8ml培养基的T25瓶中。②半量换液法：培养瓶静置5-10分钟后，将上清培养基轻轻吸走一半，剩余留有细胞沉淀的培养基重悬混匀，细胞悬液按1：2的比例分到新的含8ml培养基的T25瓶中。③注意培养基pH值变化和细胞密度，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到大于2×106个/ml时，重复传代操作或者冻存。 |
| 生长条件 | 培养温度37℃；气体环境5%CO2+95%空气； |
| 生长特征 | 悬浮 |
| 存储条件 | 液氮 |
| 类型 | 悬浮生长 |
| 安全等级 | 1 |
| 分离基物 | 外周血 |